همسانه سازی و بیان ایمونوتوکسین نوترکیب با استفاده از توکسین دیفتری و فاکتور محرک رشد کلنی گرانولوسیت

Authors

فاطمه دنیاپور

fatemeh donyapoor department of sciences and biotechnology, malek- ashtar university of technology, tehran, iran.گروه علوم و فن آوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران. مهدی زین الدینی

mehdi zeinoddini phd in biochemistry, department of sciences and biotechnology, malek- ashtar university of technology, tehran, iran.دکترای تخصصی بیوشیمی، گروه علوم و فن آوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه صنعتی مالک اشتر (malek ashtar university of technology) علی رضا سعیدی نیا

ali reza saeedinia phd in genetics, department of sciences and biotechnology, malek- ashtar university of technology, tehran, iran.دکترای تخصصی ژنتیک، گروه علوم و فن آوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه صنعتی مالک اشتر (malek ashtar university of technology)

abstract

زمینه و هدف: ایمونوتوکسین یک توکسین هدف مند است که از اتصال دو بخش مجزا (بخش ایمنی و بخش توکسینی) با واسط شیمیایی یا پپتیدی اختصاصی تشکیل می شود. هدف اصلی تحقیق حاضر تولید پروتئین هیبریدی و نوترکیب مشتمل بر توکسین دیفتری و فاکتور محرک رشد کلنی گرانولوسیتی است. مواد و روش ها: با توجه به ساختار اولین ایمنوتوکسین تجاری نوترکیب (اونتاک، پروتئین هیبریدی شامل توکسین دیفتری و اینترلوکین 2)، ژن به رمزدرآورنده توکسین دیفتری (dt) و فاکتور محرک رشد کلنی گرانولوسیت (g-csf) با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و قالب پلاسمیدی pet-idz3 (پلاسمید pet21 حاوی ژن رمز کننده ایمونوتوکسین اونتاک) و pet-gcsf (پلاسمید pet23 حاوی ژن رمز کننده g-csf) تکثیر یافت. سپس اتصال دو قطعه ژنی با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و در طی روش soeing pcr انجام شد. در ادامه، قطعه ژنی هیبریدی درون وکتور (+) pet21a منتقل گردید تا سازه ژنی pet-dt-gcsf به دست آید. ساخت این سازه ژنی از طریق توالی یابی، sds-page و وسترن بلات مورد تأیید قرار گرفت. یافته ها: ژن به رمز درآورنده ایمونوتوکسین نوترکیب بین جایگاه های آنزیمی ecori و ndei درون وکتور (+) pet21a به صورت صحیح کلون گردید و تولید سویه مولد ایمونوتوکسین نوترکیب dt-gcsf با استفاده از روش های مرسوم مورد تأیید قرار گرفت. نتیجه گیری: سیتوکین هیبرید پروتئین، dt-gcsf، می تواند در راستای مقابله با سلول های سرطانی و مهار آن ها که در سطح سلولی آن ها گیرنده های g-csf زیاد بیان می شوند، مورد استفاده قرار گیرد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

ارزیابی بیان فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت نوترکیب انسانی با کدون بهینه شده در دو سویه بیانی اشریشیا کلی Origami وBL21

سابقه و هدف: فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت (G-CSF) به عنوان فاکتور رشد هماتوپوئیتیک می‌‌تواند سلول‌های بالغ خونی را تحریک نمایند و امروزه نوع نوترکیب آن در درمان نوتروپنی ناشی از شیمی درمانی سرطان‌های سرکوبگر میلوئید، پیوند مغز استخوان، شیمی درمانی در لوسمی میلوئید حاد و نوتروپنی مزمن و شدید به کار می‌رود. هدف از این مطالعه، مقایسه بیان G-CSF نوترکیب انسانی در دو سویه از اشریشیاکلی بوده است. مو...

full text

تولید آزمایشگاهی فرم فعال ایمونوتوکسین هدف‌گذاری شده برعلیه گیرنده فاکتور محرک رشد کلونی گرانولوسیت

هدف: هدف از مطالعه‌ی حاضر، تولید پروتئین نوترکیب هیبریدی DT389GCSF به فرم فعال محلول در باکتری E. coli Bl-21(DE3) ، تخلیص و ارزیابی سمیت سلولی آن می‌باشد. مواد و روش‏ها: پروتئین DT389GCSF، با دنباله‌ی 6 هیستیدین در باکتری E. coli BL-21(DE3)  در دمای 28 درجه سانتیگراد به ‏فرم محلول بیان شد. سپس از طریق ستون کروماتوگر...

full text

ارزیابی بیان فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت نوترکیب انسانی با کدون بهینه شده در دو سویه بیانی اشریشیا کلی origami وbl۲۱

سابقه و هدف: فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت (g-csf) به عنوان فاکتور رشد هماتوپوئیتیک می تواند سلول های بالغ خونی را تحریک نمایند و امروزه نوع نوترکیب آن در درمان نوتروپنی ناشی از شیمی درمانی سرطان های سرکوبگر میلوئید، پیوند مغز استخوان، شیمی درمانی در لوسمی میلوئید حاد و نوتروپنی مزمن و شدید به کار می رود. هدف از این مطالعه، مقایسه بیان g-csf نوترکیب انسانی در دو سویه از اشریشیاکلی بوده است. مواد ...

full text

The Study of Stressful Factors in Clinical Education for Nursing Students Studying in Nursing and Midwifery College in Khorramabad

کچ هدي پ شي مز هني فده و : شزومآ لاب يني شخب ساسا ي شزومآ مهم و راتسرپ ي تسا . و هنوگ ره دوج لکشم ي شزومآ رد لاب يني ، آراک يي هدزاب و ا ني شزومآ زا شخب راچد ار لکشم م ي دنک . فده اب رضاح شهوژپ سررب ي لماوع سرتسا از ي شزومآ لاب يني رد وجشناد ناي راتسرپ ي هدکشناد راتسرپ ي و يامام ي ماـجنا داـبآ مرـخ تسا هتفرگ . شور و داوم راک : رضاح هعلاطم کي هعلاطم صوت يفي عطقم ي تسا . د...

full text

همسانه سازی، بیان و تولید فاکتور رشد فیبروبلاست10 نوترکیب انسانی (hfgf-10) در اشریشیاکلی

فاکتور رشد فیبروبلاستی-10 انسانی (hfgf-10) گلیکو پروتئین مونومری است که توسط سلولهای فیبروبلاستی در دوره ی جنینی تولید و موجب رشد و تمایز بافت ریه و تشکیل جوانه های دست و پا و رشد جهت دار آن به سمت خارج می شود و در بزرگسالی در ترمیم سلولهای آسیب دیده ی ریه و زخمها نقش ایفاء می کند. فاکتور رشد مزبور،تولید شده، بیشتر و صرفا در آزمایشگاه ها برای تولید بافت ریه استفاده می شود و نوع دارویی آن با نام...

15 صفحه اول

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک

جلد ۱۹، شماره ۵، صفحات ۴۲-۵۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023